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饲料中维生素B2的液相色谱(HPLC)检测方案
来源: | 作者:tzlnyq688 | 发布时间: 2018-05-22 | 2846 次浏览 | 分享到:

  维生素B2又叫做核黄素,为异咯嗪衍生物,桔黄色,易被碱、光及金属元素破坏。核黄素是许多氧化还原酶的重要组成部分,参与能量和蛋白质代谢。动物缺乏核黄引起体代谢紊乱。其症状:轻则表现为生长受阻,生产力下降,严重者,猪发生皮炎,形成痂皮及脓肿,眼结膜、角膜炎;母畜缺乏则出现早产,胚胎死亡及胎儿畸形;雏鸡的典型症状为足跟关节肿胀,趾内向弯曲成拳状,急性缺乏症能使腿部完全麻痹、瘫痪;种鸡缺乏时,种蛋孵化率低,雏鸡成活率低。

参考国标(GB/T 14701-2002),利用全新高性能的LC-2010高效液相色谱仪,经实践检测可提供饲料中维生素B2HPLC检测方案,得出的结果准确可靠,检出限好,适用于配合饲料、浓缩饲料、复合预混合饲料、维生素预混合饲料中维生素B2的测定。

高效液相色谱法对饲料中维生素B2的详细检测方法

一,仪器配置

仪器名称

型号

数量

液相色谱输液泵

LC-2010

1

液相色谱紫外检测器

SPD-2010

1

液相色谱手动进样阀

7725i

1

液相色谱柱

C18  

1

液相色谱工作站

双通道、中文界面

1

液相色谱前处理配件包

 

1

 

二,试样溶液的制备

称取维生素预混合饲料0.25g-0.5g,于100ml棕色容量瓶中,加入三分之二的提取液于80-100℃水浴中煮沸30min,待冷却后加入14ml甲醇,用提取液定容至刻度,混匀,过滤。维生素预混合饲料样液需有提取液进一步5-10倍,取部分过滤液过0.45µm滤膜过滤,高效液相色谱仪分析。

三,色谱条件

  色谱柱: C18   150mm×4.6mm×5μm

  流速:1.0mL/min

  温度:室温;

  进样量:20μL

  检测波长:单检维生素B2267nm,多种维生素联检为280nm

  流动相:在已装入700ml去离子水的1000ml容量瓶中,加入50mgEDTA1.1g庚烷磺酸钠,待全溶解后,加入25ml冰乙酸、5ml三乙胺,用去离子水定容至刻度摇匀。用冰乙酸、三乙胺调解pH3.4±0.02,过0.45µm滤膜,取该溶液860ml140ml甲醇混合,超声脱气,待用。

四,维生素B2标准高效液相色谱图


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